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C1INH双切口酶质粒(h) | sc-403065-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
C1INH双切口酶质粒(h2) | sc-403065-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SERPING1 编码 C1 酯酶抑制剂(C1INH),这是一种分泌型丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin),可不可逆地抑制补体系统和接触激活通路中的多种丝氨酸蛋白酶,包括 C1r/C1s、MASP-1/2、血浆激肽释放酶(plasma kallikrein)以及凝血因子 XIIa。通过限制经典途径和凝集素途径的补体激活并减少缓激肽生成,C1INH 有助于维持血管稳态,防止炎症反应被不适当地放大。SERPING1 功能受损会扰乱补体与激肽系统信号传导,这与一类以血浆蛋白酶活性失衡、血管通透性增加以及炎症性水肿表型为特征的疾病高度相关。
C1INH 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SERPING1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SERPING1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SERPING1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SERPING1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。