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C1GALT1CRISPR激活质粒(h) | sc-403509-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
C1GALT1 编码核心1型 β1,3-半乳糖基转移酶1(core 1 β1,3-galactosyltransferase 1),是一种定位于高尔基体的关键酶,负责通过将 Tn 抗原(GalNAc-Ser/Thr)转化为核心1(T 抗原)结构,从而延伸黏蛋白型 O-糖链。通过这一活性,C1GALT1 改变细胞表面及分泌型糖蛋白的组成,在上皮细胞与造血系统等环境中影响凝集素结合、受体组织方式以及对蛋白酶降解的耐受性。C1GALT1 功能异常会扰乱依赖 O-糖基化的过程,包括细胞黏附、迁移与免疫识别,并与炎症及癌症相关表型中观察到的糖链重塑有关。作为 O-糖基化通路的核心节点,C1GALT1 常被用于研究黏蛋白生物学、屏障功能,以及可调控信号微环境的糖蛋白组学变化。
C1GALT1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性C1GALT1的表达。
C1GALT1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的C1GALT1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于C1GALT1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性C1GALT1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的C1GALT1位点,并能够研究内源性位点上依赖于C1GALT1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在C1GALT1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟C1GALT1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。