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C14orf102CRISPR激活质粒(h) | sc-409988-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
NRDE2(亦注释为 C14orf102)编码一种保守的核内因子,参与 RNA 介导的基因调控与监视通路,有助于维持基因组完整性。模型系统研究将 NRDE2 与异染色质相关的转录沉默,以及 RNA 加工与 DNA 损伤应答之间的协调联系起来,支持其在细胞周期控制与应激适应中的作用。在人类细胞中,NRDE2 与核内 RNA 代谢以及与染色质相关的转录调控有关;这些过程常在细胞增殖异常和基因组不稳定等表型中受到扰动。这些通路的失调与肿瘤发生机制研究及其他疾病情境相关,因为 RNA 加工和 DNA 修复缺陷会促进疾病生物学的形成。
NRDE-2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性NRDE2的表达。
NRDE-2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的NRDE2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于NRDE2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性NRDE-2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的NRDE2位点,并能够研究内源性位点上依赖于NRDE-2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在NRDE2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟NRDE-2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。