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c-MafCRISPR激活质粒(h) | sc-410543-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
c-MafCRISPR激活质粒(h2) | sc-410543-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
MAF 编码 c-Maf,这是一种碱性亮氨酸拉链(bZIP)转录因子,负责调控免疫与非免疫组织中的谱系决定和分化程序。c-Maf 可整合来自细胞因子通路与应激反应通路的信号,调节与 T 细胞极化、巨噬细胞功能以及细胞对代谢信号适应相关的转录网络。通过调控增强子活性并与其他转录调控因子协同作用,c-Maf 影响增殖、生存及效应基因表达等过程。MAF 的表达或活性失调与免疫稳态改变以及在血液系统疾病与炎症性疾病研究中观察到的异常转录状态相关。
c-Maf CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性MAF的表达。
c-Maf CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的MAF基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于MAF转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性c-Maf表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的MAF位点,并能够研究内源性位点上依赖于c-Maf的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在MAF表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟c-Maf通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。