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c-Abl双切口酶质粒(h) | sc-400425-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
c-Abl双切口酶质粒(h2) | sc-400425-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ABL1 编码非受体型酪氨酸激酶 c-Abl。c-Abl 是一种模块化信号蛋白,可在细胞质与细胞核之间穿梭,用于协调对生长信号与细胞应激的反应。c-Abl 通过对多种底物进行磷酸化,整合并调控肌动蛋白细胞骨架重塑、细胞黏附与迁移、细胞周期推进以及 DNA 损伤信号传导等通路。ABL1 的异常激活(尤其是通过致癌融合基因)会扰乱由激酶调控的转录与细胞存活程序,因此常被用作研究恶性肿瘤中酪氨酸激酶信号失调的经典模型。在正常生理条件下,c-Abl 还参与基因组维持,并在基因毒性应激后影响细胞是否进入凋亡的决策,将激酶活性与检查点控制联系起来。
c-Abl 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ABL1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ABL1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ABL1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ABL1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。