
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
BUBR1双切口酶质粒(h) | sc-403807-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
BUBR1双切口酶质粒(h2) | sc-403807-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
BUB1B 编码 BUBR1,它是纺锤体组装检查点(SAC)的核心组分之一。SAC 监测动粒—微管的连接情况,并通过有丝分裂检查点复合体抑制 APC/C 活性,从而防止过早进入后期。BUBR1 通过调控染色体会聚、姐妹染色单体黏连以及后期进程,帮助维持基因组稳定性,并限制由染色体错误分离引起的非整倍体。BUB1B/BUBR1 的失调与染色体不稳定表型有关,并在发育性生长障碍以及癌症相关的有丝分裂检查点缺陷研究中受到关注。因此,BUBR1 常被作为解析人类细胞有丝分裂调控网络与动粒信号传导的分子切入点。
BUBR1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 BUB1B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BUB1B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏BUB1B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了BUB1B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。