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BTN3A1CRISPR激活质粒(h) | sc-404202-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
BTN3A1(乳脂球蛋白家族3亚族成员A1,CD277)是一种人类免疫调节性I型跨膜蛋白,参与抗原感知与T细胞调控,尤其通过磷酸抗原依赖的信号传导影响Vγ9Vδ2 T细胞的激活。它参与免疫突触的组织,并调控下游通路,从而影响淋巴细胞激活、细胞因子产生以及细胞毒性反应。BTN3A1的表达与信号动态常在肿瘤免疫学和炎症生物学研究中被重点检测,因为其调控异常可重塑免疫监视与细胞应激反应。作为一种细胞表面、类似免疫检查点的介导分子,BTN3A1为体外研究免疫激活阈值以及免疫–肿瘤相互作用提供了一个便于操控的关键节点。
BTN3A1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性BTN3A1的表达。
BTN3A1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的BTN3A1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于BTN3A1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性BTN3A1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的BTN3A1位点,并能够研究内源性位点上依赖于BTN3A1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在BTN3A1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟BTN3A1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。