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BTEB2双切口酶质粒(m) | sc-419372-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
BTEB2双切口酶质粒(m2) | sc-419372-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Klf5 编码转录因子 BTEB2(Krüppel 样因子 5),这是一种锌指 DNA 结合蛋白,调控上皮与间充质谱系中的增殖与分化程序。BTEB2 整合来自 MAPK/ERK、Wnt/β-连环蛋白、TGF-β 和 PI3K/AKT 通路的信号,以控制细胞周期进程、迁移以及细胞外基质重塑。在发育与组织稳态中,Klf5 的活性通过情境依赖性的转录网络影响肠隐窝动态、血管与平滑肌表型,以及形成屏障的上皮组织。Klf5/BTEB2 表达失调与炎症性重塑、纤维化及致癌性的转录状态相关,因此可作为研究生长控制与谱系可塑性机制的关键节点。
BTEB2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Klf5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Klf5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Klf5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Klf5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。