Date published: 2026-7-21

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BTBD4 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-428253

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • BTBD4 CRISPR/Cas9 基因敲除(KO)质粒(m) 是一组质粒混合物,每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA(gRNA),其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列,旨在实现最高的基因敲除效率
  • gRNA序列引导Cas9在BTBD4基因组位点诱导位点特异性双链断裂(DSBs),从而通过非同源末端连接(NHEJ)实现基因敲除
  • 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点,因此在建立稳定的基因敲除细胞系后,可以通过 Cre 重组酶(Cre 向量:sc-418923)去除选择标记。
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:BTBD4: sc-390260,通过WB, IF或者IHC分析
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    BTBD4 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m)

    sc-428253
    20 µg
    CNY2986.00

    概述

    Zbtb46 编码 BTBD4 蛋白,这是一种含 BTB/POZ 结构域的因子,参与转录调控程序,从而塑造小鼠组织中的细胞身份与分化状态。在免疫生物学中,Zbtb46 的表达被广泛用作经典树突状细胞(cDC)谱系的标志物;其调控活性常在抗原呈递、炎症信号传导以及免疫稳态监视等背景下进行研究。在肿瘤相关免疫和炎症性疾病模型中,人们也考察了与 Zbtb46 相关的基因网络变化,因为树突状细胞功能的转变会影响细胞因子谱和 T 细胞启动(priming)。因此,对 Zbtb46/BTBD4 的扰动是一种有用手段,可用于解析连接分化过程、先天免疫通路与微环境应答的转录回路。

    BTBD4 CRISPR/Cas9 KO质粒(m)是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Zbtb46基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA(sgRNA),该sgRNA针对Zbtb46基因内的特定位点,并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

    多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后,产生破坏Zbtb46开放阅读框的插入或缺失(indels)的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接(NHEJ)途径修复,通常会导致移码突变,从而使BTBD4蛋白表达失活。

    该CRISPR敲除系统能够高效构建Zbtb46缺失的细胞模型,用于BTBD4信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

    主要特点

    • 针对对 BTBD4 功能至关重要的 Zbtb46 外显子的 sgRNA
      通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
      GFP 报告基因用于识别转染细胞
      针对多个 Zbtb46 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
      兼容转染递送

    设计变体

    CRISPRs +/- HDR

    • 由 BTBD4 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 BTBD4 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Zbtb46 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
      由 BTBD4 HDR 质粒(m)编码的 HDR 供体构建体以及 BTBD4 HDR质粒(m2)编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因,其两侧由Zbtb46同源臂包围,以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Zbtb46靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。