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BRMS1CRISPR激活质粒(h) | sc-403753-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
BRMS1(乳腺癌转移抑制因子1)编码一种核蛋白,可通过与 SIN3/HDAC 染色质重塑复合物结合,发挥转移抑制因子和转录调控因子的作用。BRMS1 通过调控基因表达的表观遗传控制,影响细胞黏附、迁移、侵袭以及炎症信号传导等过程;已有报道显示其可影响由 NF-κB 调控的转录程序。BRMS1 表达异常与多种实体瘤背景下的转移进展相关,因此是研究限制肿瘤播散机制的一个有价值的分子节点。BRMS1 也适用于探究依赖染色质的转录抑制如何塑造肿瘤微环境相互作用与细胞可塑性。
BRMS1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性BRMS1的表达。
BRMS1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的BRMS1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于BRMS1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性BRMS1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的BRMS1位点,并能够研究内源性位点上依赖于BRMS1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在BRMS1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟BRMS1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。