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BRAP双切口酶质粒(h) | sc-403847-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
BRAP双切口酶质粒(h2) | sc-403847-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
BRAP(BRCA1 相关蛋白)是一种位于细胞质的 E3 泛素连接酶,可通过与 KSR1 等组分结合并对其进行泛素化来调控 MAPK 信号传导,从而塑造 RAF–MEK–ERK 通路信号强度与持续时间。通过对蛋白稳定性与转运进行泛素依赖性的调控,BRAP 影响细胞周期进程、分化以及应激反应相关的信号传导。遗传学与功能学研究已将 BRAP 的扰动与增殖信号改变及蛋白质稳态(proteostasis)失衡联系起来,而这些过程与肿瘤生物学以及神经血管疾病机制密切相关。BRAP 位于泛素化与 MAPK 通路调控的交汇点,使其成为解析人类细胞中信号转导与蛋白周转网络的一个有用节点。
BRAP 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 BRAP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BRAP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏BRAP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了BRAP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。