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BMPR-IB双切口酶质粒(m) | sc-419351-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
Bmpr1b 编码小鼠骨形态发生蛋白受体 I 型 B(BMPR-IB),这是一种丝氨酸/苏氨酸激酶受体,能够结合 BMP 配体并启动经典的 SMAD1/5/8 信号传导以及非经典的 MAPK 通路。BMPR-IB 通过将细胞外的 BMP 信号整合进调控增殖与分化的转录程序,从而参与谱系命运决定、组织形态发生与稳态维持。在发育与生殖生物学中,BMPR-IB 与骨骼模式形成和卵巢卵泡发生有关;BMP/BMPR-IB 信号的异常也与多个器官系统中分化与组织重塑失衡相关。作为信号通路的关键节点,BMPR-IB 常被用于研究其与 TGF-β 家族信号的串扰,以及在不同情境下对细胞命运决策的调控作用。
BMPR-IB 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Bmpr1b 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Bmpr1b内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Bmpr1b的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Bmpr1b基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。