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BMP-8B慢病毒激活颗粒(h) | sc-404893-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
BMP8B 编码骨形态发生蛋白 8B(BMP-8B),这是一种分泌型的 TGF-β 超家族配体,可通过 I/II 型丝氨酸/苏氨酸激酶受体传递信号,从而激活依赖 SMAD 的转录程序。BMP-8B 影响细胞命运决定、分化以及组织重塑过程,并与更广泛的 BMP/TGF-β 通路串扰相整合,共同塑造发育与稳态相关的基因表达。在人类生物学研究中,BMP 信号动力学的改变常在分化失调、与纤维化相关的重塑以及肿瘤微环境信号传导等情境下被探讨,因此 BMP8B 可作为通路绘制与功能基因组学研究中的一个有用节点。作为配体驱动通路的组成部分,BMP8B 也与旁分泌信号、分泌组调控以及下游 SMAD 靶基因网络的研究密切相关。
BMP-8B 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 BMP8B 表达。
BMP-8B 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在BMP8B转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性BMP-8B表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 BMP8B 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。