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BMAL1双切口酶质粒(m) | sc-419206-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
Arntl 编码核心昼夜节律转录因子 BMAL1。BMAL1 与 CLOCK 形成异源二聚体后结合 E-box 元件,驱动钟控基因的节律性表达。该转录–翻译反馈网络在不同组织中协调细胞层面的振荡过程,涉及代谢、氧化还原稳态、DNA 损伤应答以及免疫信号传导等。BMAL1 的活性与多条通路互作,包括 PER/CRY 介导的抑制、REV-ERB/ROR 核受体反馈环,以及调节线粒体功能并影响脂质与葡萄糖利用的营养感知程序。在模型系统中,ARNTL/BMAL1 信号失调与睡眠–觉醒和行为表型相关;在昼夜调控影响疾病相关基因表达程序的背景下,它也常被用于研究代谢、炎症、神经退行性疾病及肿瘤相关过程。
BMAL1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Arntl 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Arntl内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Arntl的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Arntl基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。