
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
BLOS1CRISPR激活质粒(h) | sc-406825-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
BLOC1S1 编码 BLOS1,它是溶酶体相关细胞器生物发生复合体 1(BLOC-1)的核心亚基之一。BLOC-1 支持内体分选以及维持溶酶体相关细胞器正常功能所需的货物运输。BLOS1 通过参与囊泡成熟和膜蛋白递送,促进包括蛋白质周转、细胞器稳态和受调控分泌在内的多种细胞过程。BLOC-1 组分的扰动与细胞内运输通路缺陷有关,这些缺陷与神经发育及神经精神表型相关,并会影响免疫相关细胞器与色素细胞器的生物学特性。因此,BLOC1S1 常用于内体-溶酶体功能障碍模型以及细胞内运输通路层级调控的研究。
BLOS1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性BLOC1S1的表达。
BLOS1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的BLOC1S1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于BLOC1S1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性BLOS1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的BLOC1S1位点,并能够研究内源性位点上依赖于BLOS1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在BLOC1S1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟BLOS1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。