BLM hydrolaseCRISPR激活质粒(h): sc-404411-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- BLM hydrolase CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- BLM hydrolase CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 BLM hydrolase CRISPR 激活质粒 (h) 和 BLM hydrolase CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 BLMH 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：BLM hydrolase: sc-166777，通过WB, IF或者IHC分析
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
BLM hydrolaseCRISPR激活质粒(h) | sc-404411-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
BLMH 编码博来霉素水解酶（bleomycin hydrolase），这是一种中性半胱氨酸蛋白酶，参与细胞内肽与氨基酸的周转，并有助于对博来霉素样化合物的细胞解毒。该酶通过对生物活性肽进行蛋白水解加工而参与蛋白稳态（proteostasis）相关过程，并可通过调控同型半胱氨酸硫内酯及其相关代谢物来影响细胞氧化还原平衡。BLMH 活性与影响蛋白质质量控制和应激反应的通路相交汇，使其表达与快速增殖或处于代谢应激的细胞表型相关。文献报道 BLMH 调控异常与神经退行性疾病及癌症相关背景有关，支持其作为研究蛋白酶功能与细胞抗逆性机制的靶标。
BLM hydrolase CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性BLMH的表达。
BLM hydrolase CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的BLMH基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于BLMH转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性BLM hydrolase表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的BLMH位点，并能够研究内源性位点上依赖于BLM hydrolase的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在BLMH表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟BLM hydrolase通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。