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Biglycan双切口酶质粒(h) | sc-401408-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Biglycan双切口酶质粒(h2) | sc-401408-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
BGN 编码大蛋白聚糖(biglycan),这是一种细胞外基质(ECM)中的小富亮氨酸重复蛋白聚糖,参与调控胶原原纤维形成、基质组织结构以及组织生物力学性质。大蛋白聚糖可结合多种生长因子和细胞表面受体,进而影响 TGF-β、Wnt/β-连环蛋白以及 Toll 样受体介导的炎症反应等信号通路,从而塑造细胞黏附、迁移与分化。BGN 表达异常及蛋白聚糖重塑与纤维化、血管与心脏重构、骨关节退变以及肿瘤—基质相互作用相关,使 BGN 成为研究 ECM 驱动的细胞信号与力学生物学的重要节点。在人类研究体系中,BGN 常被用作基质活化及基质相关炎症信号的标志物与功能介质。
Biglycan 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 BGN 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BGN内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏BGN的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了BGN基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。