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BID双切口酶质粒(h) | sc-400510-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
BID双切口酶质粒(h2) | sc-400510-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
BID 编码 BCL-2 家族中一种促凋亡的 BH3-only 成员,是连接外源性死亡受体信号与线粒体(内源性)凋亡通路的关键枢纽。BID 被半胱天冬酶-8 裂解生成截短型 BID(tBID)后,可促进 BAX/BAK 激活、线粒体外膜通透化、细胞色素 c 释放,并启动下游的半胱天冬酶级联反应。BID 的活性将应激与免疫信号整合到细胞命运决策中,并与 DNA 损伤应答、炎症信号等过程发生交叉。BID 依赖性凋亡的失调与癌细胞存活、神经退行性变以及免疫介导的组织损伤有关,因此 BID 常被作为凋亡与线粒体信号研究中的重要机制节点。
BID 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 BID 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BID内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏BID的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了BID基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。