
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
BHMT双切口酶质粒(h) | sc-405772-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
BHMT双切口酶质粒(h2) | sc-405772-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 BHMT(甜菜碱-同型半胱氨酸 S-甲基转移酶)是一种细胞质甲基转移酶,以甜菜碱作为甲基供体,催化同型半胱氨酸再甲基化生成蛋氨酸,从而将一碳代谢与蛋氨酸/S-腺苷甲硫氨酸(SAM)稳态联系起来。BHMT 通过调控同型半胱氨酸的代谢通量,影响细胞甲基化能力、氧化还原平衡以及渗透调节物质代谢,并进一步作用于表观遗传调控和肝脏代谢程序。BHMT 活性异常与高同型半胱氨酸血症以及代谢性和肝脏相关疾病中观察到的甲基供体平衡紊乱有关,因此它是研究依赖甲基化的通路以及营养素–基因相互作用的一个重要节点。
BHMT 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 BHMT 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BHMT内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏BHMT的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了BHMT基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。