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Bex1CRISPR激活质粒(h) | sc-404292-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
BEX1(brain expressed X-linked 1,X 连锁脑表达基因 1)编码 Bex1 蛋白。该蛋白是一种内在无序、类似接头蛋白的因子,在神经组织中富集,可调控与神经元分化、生存及应激反应相关的转录程序与信号转导。研究提示,Bex1 可通过与神经营养因子信号以及 MAPK/ERK 等相关过程的相互作用,参与调控细胞周期进程与细胞凋亡,并在不同情境下对增殖与分化产生依赖背景的影响。多种肿瘤类型中均有 BEX1 表达异常的报道,同时在神经发育与神经退行性研究中也被广泛涉及,支持其作为谱系决定与细胞可塑性研究中的标志物及机制关键节点。这些特性使 BEX1 有助于解析将分化状态与生长控制相耦联的基因调控网络。
Bex1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性BEX1的表达。
Bex1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的BEX1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于BEX1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Bex1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的BEX1位点,并能够研究内源性位点上依赖于Bex1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在BEX1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Bex1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。