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beta 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1B3双切口酶质粒(h) | sc-404570-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
beta 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1B3双切口酶质粒(h2) | sc-404570-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ATP1B3 编码 Na⁺/K⁺-ATPase 的 β3 亚基;Na⁺/K⁺-ATPase 是位于质膜上的 P 型 ATP 酶复合体,对维持 Na⁺ 与 K⁺ 梯度至关重要,而这些梯度支撑膜电位、渗透平衡以及继发性主动转运。除离子稳态外,Na⁺/K⁺-ATPase 各亚基还参与泵体的组装与转运,并可影响与细胞黏附、迁移和生长调控相关的信号输出。ATP1B3 的表达与泵功能还通过对转运体和激酶的离子依赖性调控,与上皮极性、神经元兴奋性及应激反应等过程相交织。Na⁺/K⁺-ATPase 亚基组成的失衡与增殖信号异常及组织功能障碍有关,因此 ATP1B3 是研究膜转运与信号串扰机制的有用靶点。
beta 3 Sodium Potassium ATPase/ATP1B3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ATP1B3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ATP1B3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ATP1B3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ATP1B3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。