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beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-ARCRISPR激活质粒(m) | sc-419027-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-ARCRISPR激活质粒(m2) | sc-419027-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
小鼠 Adrb2 基因编码 β2-肾上腺素能受体(ADRB2/β2-AR),这是一类 G 蛋白偶联受体(GPCR),可将儿茶酚胺信号转导为细胞内 cAMP/PKA 的调控以及下游 CREB 依赖性转录。β2-AR 信号可调节平滑肌张力、心脏变时性、代谢通量和免疫细胞激活;同时也会启动 GRK/β-arrestin 通路,从而影响受体去敏化、转运/内吞以及 MAPK 信号输出。在小鼠模型中,Adrb2 活性影响应激反应相关的生理过程、气道反应性、能量平衡和炎症程序,因此与类哮喘表型、心代谢性状以及神经-免疫相互作用等研究密切相关。这些功能使 Adrb2 成为解析肾上腺素能对 GPCR 信号网络与细胞状态调控的一个重要节点。
beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR CRISPR激活质粒(m)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Adrb2的表达。
beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR CRISPR激活质粒(m)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的Adrb2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于Adrb2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的Adrb2位点,并能够研究内源性位点上依赖于beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Adrb2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。