Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BECN1/Beclin-1双切口酶质粒(h): sc-400139-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- BECN1/Beclin-1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- BECN1/Beclin-1双切酶质粒（h）和BECN1/Beclin-1双切酶质粒（h2）编码针对BECN1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：BECN1/Beclin-1: sc-48341，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
BECN1/Beclin-1双切口酶质粒(h) | sc-400139-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
BECN1/Beclin-1双切口酶质粒(h2) | sc-400139-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
BECN1（Beclin-1，Beclin-1蛋白）通过与PIK3C3/VPS34、ATG14和UVRAG共同组装III类PI3K复合体，在自噬起始与自噬体成核过程中发挥核心调控作用。Beclin-1通过在新生吞噬泡（phagophore）处协调磷脂酰肌醇3-磷酸（PI3P）的生成，将营养感知与应激反应连接到溶酶体降解通路，从而影响蛋白质稳态、细胞器质量控制以及先天免疫信号传导。BECN1的活性受其与BCL2家族蛋白的相互作用以及多种磷酸化事件调控，这些调控整合了来自mTOR、AMPK及凋亡通路的信号。BECN1依赖性自噬的失调与神经退行性疾病、感染生物学以及癌症相关的细胞适应有关，因此它常被作为稳态与应激响应网络中的关键节点进行研究。
BECN1/Beclin-1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 BECN1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BECN1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏BECN1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了BECN1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。