BCoRCRISPR激活质粒(h): sc-409976-ACT

BCOR（BCL6 共抑制因子）编码 BCoR，这是一种核内转录共调控因子，可与序列特异性的转录因子及表观遗传修饰因子协同作用，在发育与谱系承诺过程中协调基因沉默。BCoR 在非经典 Polycomb 抑制复合体中发挥功能，将 DNA 结合因子与染色质重塑及组蛋白修饰程序连接起来，从而塑造细胞身份与分化。BCOR 的破坏或失调与造血及间充质相关背景下转录调控异常有关，并在多种肿瘤类型与发育障碍中反复被牵涉。作为一种与染色质相关的共抑制因子，BCoR 常因其在转录网络、细胞命运转换以及表观遗传稳定性中的作用而受到研究关注。

BCoR CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性BCOR的表达。

BCoR CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的BCOR基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于BCOR转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性BCoR表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的BCOR位点，并能够研究内源性位点上依赖于BCoR的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在BCOR表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟BCoR通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。