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BCMA双切口酶质粒(h) | sc-403058-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
BCMA双切口酶质粒(h2) | sc-403058-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TNFRSF17 编码 B 细胞成熟抗原(BCMA),它属于 TNF 受体超家族成员,主要在晚期 B 细胞和浆细胞上表达。BCMA 可与 APRIL 和 BAFF 结合,激活 NF-κB 及相关的细胞存活程序,从而支持抗体分泌细胞的维持、免疫球蛋白的产生,以及骨髓微环境中浆细胞的长期存活。BCMA 信号传导与表达的失调与异常的浆细胞扩增及 B 细胞谱系相关病理密切相关,因此它是研究体液免疫、B 细胞分化以及依赖微环境的存活通路的关键节点。作为一种具有明确配体与下游效应分子的细胞表面受体,BCMA 也是在人体免疫细胞中解析受体介导信号与转录响应的理想研究靶点。
BCMA 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TNFRSF17 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TNFRSF17内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TNFRSF17的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TNFRSF17基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。