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Bcl-2双切口酶质粒(h) | sc-400025-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Bcl-2双切口酶质粒(h2) | sc-400025-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 **BCL2** 基因编码 Bcl-2 蛋白,这是一种关键的抗凋亡调控因子,能够维持线粒体外膜完整性并限制细胞色素 c 的释放。Bcl-2 通过与促凋亡的 BAX/BAK 及 BH3-only 蛋白相互作用来抑制内源性凋亡,从而影响半胱天冬酶(caspase)激活、细胞应激反应以及生存信号传导。BCL2 表达或调控方式的改变会打破细胞生存与程序性细胞死亡之间的平衡,进而影响诸如淋巴细胞稳态和应激适应等过程。在人类疾病模型中,Bcl-2 活性失调常被用于研究肿瘤相关的生存优势、治疗耐受机制以及凋亡通路的重塑。
Bcl-2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 BCL2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BCL2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏BCL2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了BCL2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。