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BAZ2BCRISPR激活质粒(h) | sc-407635-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
BAZ2BCRISPR激活质粒(h2) | sc-407635-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
BAZ2B(锌指结构域邻近溴结构域蛋白 2B)是一种与染色质相关的调控因子,可通过其溴结构域结合乙酰化组蛋白,并参与核小体重塑与转录调控。BAZ2B 通过协调染色质可及性,影响 RNA 聚合酶 II 依赖的基因表达程序,这些程序与细胞身份维持、增殖和分化有关。染色质“读取器”活性异常以及转录网络失调是癌症和神经发育相关表型的常见特征,因此 BAZ2B 是研究表观遗传通路扰动的一个有价值节点。对 BAZ2B 功能的研究有助于从机制层面解析组蛋白乙酰化信号、染色质重塑动力学以及情境特异性的基因调控。
BAZ2B CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性BAZ2B的表达。
BAZ2B CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的BAZ2B基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于BAZ2B转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性BAZ2B表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的BAZ2B位点,并能够研究内源性位点上依赖于BAZ2B的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在BAZ2B表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟BAZ2B通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。