非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
BARD1 抗体 (E-11)：sc-74559。未经处理的 HeLa（A）、化学处理的 HeLa（B）、K-562（C）、未经处理的 HCT-116（D）和化学处理的 HCT-116（E、F）全细胞裂解液中 BARD1 表达的 Western 印迹分析。β-Actin (C4)：sc-47778用作加载对照。所用检测试剂：m-IgG Fc BP-HRP：sc-525409。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
BARD1双切口酶质粒(h): sc-401212-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- BARD1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- BARD1双切酶质粒（h）和BARD1双切酶质粒（h2）编码针对BARD1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：BARD1: sc-74559，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
BARD1双切口酶质粒(h) | sc-401212-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
BARD1双切口酶质粒(h2) | sc-401212-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
BARD1（BRCA1 相关 RING 结构域蛋白 1）是一种抑癌蛋白，可与 BRCA1 形成必需的异源二聚体，从而构成对基因组稳定性至关重要的 E3 泛素连接酶复合物。该复合物协调 DNA 双链断裂修复、复制叉保护以及细胞周期检查点信号传导，使 BARD1 与同源重组及更广泛的 DNA 损伤应答通路相联系。通过其 RING 结构域和锚蛋白重复（ankyrin repeat）结构域，BARD1 有助于调控蛋白泛素化，并促进修复因子在损伤位点的募集。BARD1 的失调或致病性变异与 DNA 修复能力受损及基因组不稳定性增加相关，支持其在癌症易感机制研究中的重要性。
BARD1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 BARD1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BARD1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏BARD1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了BARD1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。