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BAP1双切口酶质粒(m) | sc-430539-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Bap1 编码 BRCA1 相关蛋白 1(BAP1),这是一种核内去泛素化酶,可通过 PR-DUB 复合体调控染色质状态和转录程序,其中包括去除组蛋白 H2A 上的泛素。BAP1 还参与 DNA 损伤信号传导、细胞周期控制和细胞凋亡,将依赖泛素的蛋白质调控与基因组完整性的维持联系起来。通过这些功能,BAP1 有助于在增殖细胞中协调表观遗传调控与应激反应。BAP1 活性异常在癌症生物学和肿瘤抑制通路中被广泛研究,使 Bap1 成为开展染色质重塑与 DNA 修复机制研究的重要靶点。
BAP1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Bap1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Bap1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Bap1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Bap1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。