BAP1 Double Nickase Plasmid (h): sc-400232-NIC. Western blot analysis of BAP1 expression in non-transfected control (A) and BAP1 Double Nickase Plasmid transfected (B) HEK293T whole cell lysates. Blot probed with BAP1 (F-6): sc-48386. α-actinin (H-2): sc-17829 used as specificity and loading control.
BAP1双切口酶质粒(h): sc-400232-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- BAP1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- BAP1双切酶质粒（h）和BAP1双切酶质粒（h2）编码针对BAP1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：BAP1: sc-28383，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
BAP1双切口酶质粒(h) | sc-400232-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
BAP1双切口酶质粒(h2) | sc-400232-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
BRCA1 相关蛋白 1（BAP1）编码一种核内去泛素化酶，可与 ASXL 蛋白形成 PR-DUB 复合体，去除组蛋白 H2A 上的单泛素修饰（H2AK119ub），从而调控染色质可及性与转录输出。BAP1 通过与 Polycomb 相关通路及其他转录调控因子的相互作用，参与表观遗传调控、DNA 损伤信号传导、细胞周期控制以及分化程序。BAP1 功能受损与基因组维护异常、基因表达紊乱以及细胞命运决定的改变有关。在人类疾病研究中，BAP1 常在肿瘤抑制网络与谱系特异性脆弱性的背景下被重点关注，其中表观遗传失调与修复通路受损共同促进发病机制形成。
BAP1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 BAP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BAP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏BAP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了BAP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。