Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Atg12 Antibody (C-6): sc-271688. Western blot analysis of Atg12-ATG5 conjugate expression in IMR-32 (A), T98G (B), c4 (C) and Neuro-2A (D) whole cell lysates.
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Atg12双切口酶质粒(h): sc-401894-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Atg12 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Atg12双切酶质粒（h）和Atg12双切酶质粒（h2）编码针对ATG12的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Atg12: sc-271688，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Atg12双切口酶质粒(h) | sc-401894-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Atg12双切口酶质粒(h2) | sc-401894-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ATG12 基因编码 Atg12，这是一种类泛素修饰蛋白，可与 ATG5 发生共轭，并与 ATG16L1 结合形成 ATG12–ATG5–ATG16L1 复合物，这是自噬体生物发生的核心组分。该复合物促进 LC3/ATG8 的脂质化，并在巨自噬过程中推动隔离膜（phagophore）的扩展，将营养感知、细胞器质量控制与蛋白质稳态调节连接到溶酶体降解通路。通过这些作用，Atg12 有助于塑造细胞对代谢应激、氧化损伤和病原体侵袭的反应；而自噬通量的改变已被认为与肿瘤生物学、神经退行性变以及炎症性疾病相关。因此，研究中常通过 ATG12 依赖性通路来探究自噬体形成、选择性自噬以及适应应激的信号网络。
Atg12 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ATG12 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ATG12内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ATG12的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ATG12基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。