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ATF-5双切口酶质粒(h) | sc-416821-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
ATF5 编码激活转录因子 5(ATF-5),这是一种碱性亮氨酸拉链(bZIP)转录因子,负责协调与细胞应激适应、生存以及谱系维持相关的基因表达程序。ATF-5 的活性通常与未折叠蛋白反应(UPR)和整合应激反应(ISR)信号相耦联,包括依赖 PERK–eIF2α–ATF4 轴的转录调控,并且还能影响线粒体稳态及与凋亡相关的转录网络。在多种细胞系统中,ATF-5 促进细胞增殖并增强对代谢或蛋白毒性应激的耐受性,因此与致癌信号、分化状态以及应激驱动的转录重塑研究密切相关。已有研究报道 ATF5 表达失调存在于多种肿瘤背景和神经生物学模型中,这也支持在疾病相关表型中进一步探究其下游靶标及通路依赖性。
ATF-5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ATF5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ATF5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ATF5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ATF5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。