Date published: 2026-7-21

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ART1双切口酶质粒(m): sc-419208-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • ART1 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • ART1双切酶质粒(m)和ART1双切酶质粒(m2)编码针对Art1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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    ART1双切口酶质粒(m)

    sc-419208-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    ART1双切口酶质粒(m2)

    sc-419208-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    小鼠 Art1 基因编码胞外 ADP-核糖基转移酶 1(ART1)。ART1 是一种通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定在细胞表面的酶,能够将胞外 NAD+ 上的 ADP-核糖转移到底物蛋白(位于细胞表面)上。该单 ADP-核糖基化修饰可调节受体功能、细胞—细胞相互作用,以及与免疫调控和组织重塑相关的下游信号事件。ART1 的活性与胞外 NAD+ 代谢及炎症信号网络相互交叉,这些网络会影响白细胞活化与上皮屏障反应。ART1 介导的 ADP-核糖基化改变已在炎症与自身免疫表型以及肿瘤相关微环境信号等背景中被研究,因此对机制性研究具有意义。

    ART1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Art1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Art1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Art1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Art1基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。