非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
ARP 抗体 (B-3): sc-515906. ARPE-19 (A), M1 (B), F9 (C), c4 (D), NIH/3T3 (E) 和 PC-12 (F) 全细胞裂解液中 ARP 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
ARP双切口酶质粒(m): sc-428989-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ARP 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ARP双切酶质粒（m）和ARP双切酶质粒（m2）编码针对Manf的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ARP: sc-515906，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ARP双切口酶质粒(m) | sc-428989-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
中脑星形胶质细胞来源的神经营养因子（MANF）是一种驻留于内质网、可被应激诱导的蛋白质，能够在哺乳动物细胞中支持蛋白质稳态（proteostasis）以及分泌通路的稳态。在小鼠中，MANF 与未折叠蛋白反应（UPR）和内质网相关质量控制（ER-associated quality control）密切相关，可在内质网应激和蛋白折叠受扰动时调节细胞生存程序。MANF 信号的异常已在神经退行性变、代谢应激和炎症性组织损伤等情境中得到研究，这些情境中内质网应激与特定细胞类型的易损性相互交织。这些特性使 MANF 成为在生物医学模型中探究内质网应激适应、分泌细胞功能以及与应激相关的转录重塑的一个有用节点。
ARP 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Manf 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Manf内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Manf的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Manf基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。