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Arc双切口酶质粒(h) | sc-400231-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Arc双切口酶质粒(h2) | sc-400231-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARC 编码活动调控的细胞骨架相关蛋白(Arc)。Arc 属于即刻早期基因产物,可将神经元活动与突触重塑相耦联。Arc 调控 AMPA 受体的内吞、肌动蛋白细胞骨架动力学以及突触后组分的运输,从而影响长时程增强/抑制(LTP/LTD)和稳态突触缩放。Arc 通过与内吞及细胞骨架相关机制相互作用,整合谷氨酸能神经传递下游信号与钙依赖性通路,以调节经验依赖的可塑性。ARC 的表达或功能异常已与神经精神疾病和神经退行性疾病研究中的相关机制联系起来,包括突触连接失衡以及与记忆相关的过程异常。
Arc 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ARC 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ARC内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ARC的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ARC基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。