Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ARA70 Antibody (C-4): sc-373739. Western blot analysis of ARA70 expression in 3T3-L1 whole cell lysate.
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ARA70双切口酶质粒(m): sc-424185-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ARA70 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ARA70双切酶质粒（m）和ARA70双切酶质粒（m2）编码针对Ncoa4的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ARA70: sc-373739，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ARA70双切口酶质粒(m) | sc-424185-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Ncoa4 编码 ARA70，这是一种核受体共激活因子，可通过与雄激素受体及相关核受体复合体相互作用，调控配体依赖性的转录。ARA70 影响与染色质相关的转录程序，从而调节细胞增殖、分化与代谢，并整合类固醇激素信号与共调控因子通路之间的输入。NCOA4 还通过铁蛋白自噬（ferritinophagy）参与铁稳态：它与由 NCOA4 介导的自噬机制协同，将铁蛋白递送至溶酶体，从而把核受体生物学与自噬及氧化应激反应联系起来。这些过程的失调与激素信号改变、铁依赖性的细胞易损性，以及与癌症生物学和神经退行性变研究相关的表型有关。
ARA70 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Ncoa4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ncoa4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Ncoa4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Ncoa4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。