Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Simultaneous direct near-infrared western blot analysis of AQP5 expression, detected with AQP5 Antibody (D-7) Alexa Fluor® 790: sc-514022 AF790 and β-Actin expression, detected with β-Actin (C4) Alexa Fluor® 680: sc-47778 AF680 in Caco-2 (A) and COLO 320DM (B) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
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Aquaporin 5/AQP5双切口酶质粒(h): sc-400567-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Aquaporin 5/AQP5 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Aquaporin 5/AQP5双切酶质粒（h）和Aquaporin 5/AQP5双切酶质粒（h2）编码针对AQP5的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Aquaporin 5/AQP5: sc-514022，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Aquaporin 5/AQP5双切口酶质粒(h) | sc-400567-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Aquaporin 5/AQP5双切口酶质粒(h2) | sc-400567-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
AQP5 编码水通道蛋白 5（aquaporin 5），这是一种膜水通道，能够促进水分在上皮细胞和腺体细胞膜上的快速、由渗透压驱动的跨膜转运。在人类中，AQP5 参与唾液腺与泪腺以及气道和肺泡上皮的液体分泌与水合调控，从而影响上皮屏障生理以及黏膜表面液体稳态。其调控与多种调节膜转运与渗透平衡的信号过程相互交织，包括与钙离子和 cAMP 相关的通路，这些通路可影响通道的定位以及上皮转运动力学。文献报道，AQP5 的表达水平或定位异常与分泌功能失调和上皮液体平衡紊乱相关，涉及气道炎症相关状况、腺体功能障碍，以及与肿瘤相关的细胞迁移和组织水合变化。
Aquaporin 5/AQP5 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 AQP5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对AQP5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏AQP5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了AQP5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。