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apolipoprotein E/apoE双切口酶质粒(m) | sc-419167-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Apoe 编码载脂蛋白 E(apoE)。apoE 是一种分泌型脂质结合蛋白,通过与脂蛋白颗粒结合并与 LDL 受体家族成员相互作用,介导胆固醇和甘油三酯的运输。apoE 调控脂蛋白摄取、巨噬细胞脂质处理以及炎症信号传导,整合了脂蛋白清除、逆向胆固醇转运以及中枢神经系统中小胶质细胞反应等通路。在小鼠模型中,Apoe 状态会显著影响动脉粥样硬化斑块生物学、肝脏脂质代谢,以及与淀粉样蛋白沉积和突触维持相关的神经免疫表型。这些功能使 Apoe 成为研究心代谢疾病机制以及体内与原代细胞中与神经退行性相关的脂质—免疫串扰的核心节点。
apolipoprotein E/apoE 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Apoe 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Apoe内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Apoe的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Apoe基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。