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apolipoprotein E/apoE双切口酶质粒(h) | sc-400860-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
apolipoprotein E/apoE双切口酶质粒(h2) | sc-400860-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 APOE 基因编码载脂蛋白 E(apoE)。apoE 是一种分泌型脂蛋白组分,通过与 LDLR、LRP1 等受体结合,介导胆固醇和甘油三酯的运输,并协调脂蛋白的清除与再分配。apoE 影响脂质稳态、膜重塑以及受体驱动的内吞作用,因此与调控细胞胆固醇外排、脂蛋白颗粒代谢以及组织驻留巨噬细胞和胶质细胞中的炎症信号通路相关联。APOE 的遗传变异与表达异常与脂质处理失衡及与神经退行性变相关的神经炎症过程密切相关,也与动脉粥样硬化相关生物学有关。因此,APOE 常被用于研究脂质转运、突触维持以及免疫-代谢串扰等模型体系。
apolipoprotein E/apoE 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 APOE 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对APOE内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏APOE的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了APOE基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。