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apoC1CRISPR激活质粒(h) | sc-403713-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 APOC1 基因编码载脂蛋白 C-I(apoC1),这是一种小分子、可交换的载脂蛋白,可与高密度脂蛋白(HDL)及富含甘油三酯的脂蛋白结合,从而调节脂质的运输与清除。apoC1 通过调控其与脂肪酶和受体的相互作用来影响脂蛋白重塑过程,包括对极低密度脂蛋白(VLDL)代谢和胆固醇稳态的影响。借助这些功能,APOC1 参与将肝脏脂质处理、巨噬细胞泡沫细胞生物学以及血管微环境中的炎症信号联系起来的相关通路。已有报道显示,APOC1 表达改变与血脂异常及心脏代谢表型相关,同时也被用于研究神经炎症以及与阿尔茨海默病相关的脂质通路。
apoC1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性APOC1的表达。
apoC1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的APOC1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于APOC1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性apoC1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的APOC1位点,并能够研究内源性位点上依赖于apoC1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在APOC1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟apoC1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。