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ANT1双切口酶质粒(h) | sc-400679-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ANT1双切口酶质粒(h2) | sc-400679-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SLC25A4 编码腺嘌呤核苷酸转位酶 1(ANT1),这是一种位于线粒体内膜的转运载体,负责在线粒体膜两侧交换 ADP 和 ATP,从而将氧化磷酸化与细胞质的能量需求相耦联。ANT1 在线粒体生物能量学、膜电位维持以及通透性转换与细胞凋亡的调控中至关重要,因此与应激反应和线粒体质量控制密切相关。ANT1 功能异常与多种神经肌肉与代谢表型有关,包括线粒体肌病以及与心肌病相关的通路,使其成为研究组织特异性能量代谢的重要靶点。在人体细胞中,ANT1 还与更广泛的线粒体载体网络发生互作,从而影响氧化还原平衡与活性氧(ROS)信号传导。
ANT1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SLC25A4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SLC25A4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SLC25A4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SLC25A4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。