非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
ANKTM1双切口酶质粒(m): sc-435491-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ANKTM1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ANKTM1双切酶质粒（m）和ANKTM1双切酶质粒（m2）编码针对Trpa1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ANKTM1双切口酶质粒(m) | sc-435491-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Trpa1 编码 ANKTM1（TRPA1），这是一种属于瞬时受体电位（TRP）家族的多模态、非选择性阳离子通道，能够整合电亲性刺激物、活性氧/氮物种以及炎症介质等信号，从而调控感觉神经元的兴奋性。通道被激活后会驱动钙离子内流，并触发下游信号传导，进而塑造伤害感受、神经源性炎症以及气道与血管反应，使 TRPA1 与氧化应激感知、以及受 GPCR 和激酶调控的离子通道门控等过程相联系。TRPA1 的活性还可通过介质释放以及神经元—免疫系统的串扰与炎症通路交汇，在临床前模型中影响痛觉过敏和瘙痒等表型。TRPA1 信号失衡与炎症性疼痛状态、神经病理性疼痛机制、咳嗽与类哮喘样气道高反应性，以及偏头痛相关的感觉处理等有关，支持其在神经生物学与免疫生理学研究中的广泛重要性。
ANKTM1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Trpa1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Trpa1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Trpa1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Trpa1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。