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ANKS6慢病毒激活颗粒(h) | sc-406150-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 ANKS6 基因编码一种含有 ankyrin 重复序列和 SAM 结构域的支架蛋白,参与肾单位发育以及与纤毛相关的信号传导。ANKS6 在初级纤毛与基底体处参与蛋白复合体的组装,支持协调平面细胞极性、上皮形态发生与管状结构形成(tubulogenesis)的相关通路。ANKS6 的遗传性破坏与纤毛病(ciliopathy)表型有关,包括与肾单位痨(nephronophthisis)相关的肾脏疾病;在这些疾病中,纤毛功能缺陷会促使囊性与纤维化重塑。作为纤毛依赖性信号的关键调控节点,ANKS6 常在肾上皮分化模型以及用于研究细胞极性与机械感受反应的体系中被深入探究。
ANKS6 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ANKS6 表达。
ANKS6 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在ANKS6转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ANKS6表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 ANKS6 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。