非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
AMPK alpha 2双切口酶质粒(m): sc-430803-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- AMPK alpha 2 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- AMPK alpha 2双切酶质粒（m）和AMPK alpha 2双切酶质粒（m2）编码针对Prkaa2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
AMPK alpha 2双切口酶质粒(m) | sc-430803-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
Prkaa2 编码 AMP 活化蛋白激酶（AMPK）的催化性 α2 亚基。AMPK 是细胞能量状态的核心感受器，当 AMP/ADP 相对于 ATP 的水平升高时被激活。AMPKα2 通过磷酸化一系列靶蛋白来协调代谢稳态：促进葡萄糖摄取、脂肪酸氧化和自噬，同时抑制脂质与蛋白质合成等合成代谢过程；它整合 LKB1 与 CaMKK2 通路的信号，并与 mTOR 和胰岛素信号通路发生交叉。在小鼠组织中，AMPKα2 尤其与骨骼肌和心脏的能量代谢密切相关，并参与对能量应激的适应以及线粒体功能调控。AMPK 信号失调在代谢性疾病模型、缺血/应激反应以及炎症相关表型研究中被广泛关注，因此 Prkaa2 常被用作机制研究的靶点。
AMPK alpha 2 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Prkaa2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Prkaa2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Prkaa2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Prkaa2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。