Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
AMPKα1/2 Antibody (D-6) Alexa Fluor® 647: sc-74461 AF647. Direct fluorescent western blot analysis of AMPKα1/2 expression in MCF7 (A), Jurkat (B), HEL 92.1.7 (C) and K-562 (D) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
AMPK alpha 2双切口酶质粒(h): sc-400277-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- AMPK alpha 2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- AMPK alpha 2双切酶质粒（h）和AMPK alpha 2双切酶质粒（h2）编码针对PRKAA2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
AMPK alpha 2双切口酶质粒(h) | sc-400277-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
AMPK alpha 2双切口酶质粒(h2) | sc-400277-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PRKAA2 编码 AMP 活化蛋白激酶（AMPK）的催化性 α2 亚基。AMPK 是细胞能量状态的核心感应器，可被 AMP/ADP 以及 LKB1 等上游激酶激活。AMPKα2 通过调控葡萄糖摄取、脂肪酸氧化、自噬和线粒体生物发生等通路来协调代谢适应，同时还可通过包括 mTORC1 在内的靶点抑制合成代谢信号。在人类细胞中，PRKAA2 依赖的信号传导参与营养受限和缺氧条件下的应激反应，并塑造影响细胞增殖与存活的转录程序。AMPKα2 活性失调与代谢性疾病及癌症相关的代谢重编程有关，因此 PRKAA2 是能量稳态与应激信号网络中常被研究的关键节点。
AMPK alpha 2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PRKAA2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PRKAA2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PRKAA2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PRKAA2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。