非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Amphiphysin II CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-401263
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Amphiphysin II CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Amphiphysin II基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Amphiphysin II: sc-23918，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Amphiphysin II CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-401263 | 20 µg | $397.00 |
概述
BIN1 编码 amphiphysin II（amphiphysin II/两亲蛋白 II），这是一种具有感知膜曲率的 BAR 结构域蛋白。它通过与 dynamin、磷脂酰肌醇类脂质以及肌动蛋白细胞骨架相互作用，协调网格蛋白介导的内吞作用、T 管（横小管）生物发生以及膜重塑。在人类细胞中，BIN1 通过耦联囊泡裂解与细胞骨架组织，帮助维持细胞内转运与信号传导的稳态；并且其不同剪接同工型在肌肉与神经系统情境下具有特异性功能。BIN1 的遗传变异与表达改变与多种肌病相关，包括中央核肌病；同时它也参与与神经退行相关的通路，例如内体转运以及与淀粉样蛋白相关、与阿尔茨海默病相关的过程。这些作用使 amphiphysin II 成为研究膜动力学、突触生物学与肌细胞结构的一个重要节点。
Amphiphysin II CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中BIN1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对BIN1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏BIN1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Amphiphysin II蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建BIN1缺失的细胞模型，用于Amphiphysin II信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Amphiphysin II 功能至关重要的 BIN1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 BIN1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Amphiphysin II CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Amphiphysin II CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 BIN1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Amphiphysin II HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Amphiphysin II HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由BIN1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定BIN1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。