Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Alix双切口酶质粒(h): sc-400350-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Alix 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Alix双切酶质粒（h）和Alix双切酶质粒（h2）编码针对PDCD6IP的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Alix: sc-53540，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Alix双切口酶质粒(h) | sc-400350-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Alix双切口酶质粒(h2) | sc-400350-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PDCD6IP 编码 Alix，这是一种与 ESCRT 复合体相关的衔接适配蛋白，负责协调多种膜重塑事件，包括多囊泡体（multivesicular body, MVB）生成、内体货物分选以及外泌体生物发生。Alix 可与 ESCRT-I/III 组分及 TSG101、CHMP4 等伙伴相互作用，支持胞质分裂末期的断裂分离（cytokinetic abscission）、质膜修复和受体下调，从而将其与生长因子和免疫信号的输出联系起来。由于参与内体-溶酶体转运以及膜出芽过程，Alix 常被用于研究病毒出芽/释放、自噬相关的膜动态以及神经元稳态。PDCD6IP 依赖的转运过程发生失调与细胞外囊泡信号传递和蛋白稳态（proteostasis）通路的改变有关，这些变化与癌症生物学、神经退行性疾病及炎症状态具有相关性。
Alix 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PDCD6IP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PDCD6IP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PDCD6IP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PDCD6IP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。