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Aldolase A双切口酶质粒(h) | sc-401349-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Aldolase A双切口酶质粒(h2) | sc-401349-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ALDOA 编码糖酵解酶--果糖二磷酸醛缩酶A(aldolase A)。该酶催化果糖-1,6-二磷酸可逆裂解为甘油醛-3-磷酸和二羟基丙酮磷酸,从而支持 ATP 生成以及中心代谢中的碳流通量。除糖酵解与糖异生之外,醛缩酶A还可通过与细胞骨架成分相互作用来影响细胞结构,将代谢状态与细胞运动和应激反应联系起来。ALDOA 表达或活性异常与增殖和缺氧环境(包括肿瘤生物学)中观察到的代谢重编程有关,也与影响肌肉及红细胞生理的疾病相关。这些特性使 ALDOA 成为研究能量稳态、代谢可塑性以及糖酵解扰动所引发下游信号效应的一个有用节点。
Aldolase A 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ALDOA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ALDOA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ALDOA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ALDOA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。