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Aldehyde dehydrogenase 2/ALDH2双切口酶质粒(h) | sc-400809-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Aldehyde dehydrogenase 2/ALDH2双切口酶质粒(h2) | sc-400809-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ALDH2 编码线粒体乙醛脱氢酶2,是在 NAD(P)+ 依赖的氧化反应中催化活性醛类的重要酶,相关醛类主要来源于乙醇代谢与脂质过氧化。通过清除乙醛以及 4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal)等有毒的脂质来源醛类,ALDH2 维持线粒体氧化还原稳态、限制氧化应激,并保护蛋白质和细胞膜免于形成醛加成物。ALDH2 的活性与线粒体质量控制、ROS 信号传导以及更广泛的外源化合物与中间代谢通路相互关联。ALDH2 功能的改变与对醛类诱导的细胞损伤易感性差异有关,因此常在酒精相关组织应激、心代谢表型以及神经退行性疾病机制等研究背景中被重点关注。
Aldehyde dehydrogenase 2/ALDH2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ALDH2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ALDH2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ALDH2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ALDH2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。