非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
AKAP 12 抗体 (C-12): sc-376740. HCT 116 全细胞裂解液中 AKAP 12 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
AKAP 12双切口酶质粒(h): sc-406008-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- AKAP 12 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- AKAP 12双切酶质粒（h）和AKAP 12双切酶质粒（h2）编码针对AKAP12的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：AKAP 12: sc-376740，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
AKAP 12双切口酶质粒(h) | sc-406008-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
AKAP 12双切口酶质粒(h2) | sc-406008-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
AKAP12 编码 A-激酶锚定蛋白 12（A-kinase anchoring protein 12，AKAP12），这是一种支架蛋白，可在空间上组织 PKA、PKC 以及磷酸酶，从而在质膜与细胞骨架处协调区室化信号传导。AKAP12 通过整合由 GPCR 与生长因子驱动通路的信号，调控与肌动蛋白相关的过程，进而影响细胞形态、运动能力、黏附动态以及细胞骨架重塑。AKAP12 的表达变化或其所处信号环境的改变，已被关联到迁移与增殖程序的失调，这与肿瘤生物学以及血管/炎症反应密切相关。这些特性使 AKAP12 成为研究“锚定激酶信号”如何调控屏障功能、应激反应以及依赖微环境的表型的有用靶点。
AKAP 12 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 AKAP12 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对AKAP12内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏AKAP12的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了AKAP12基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。